Eugenolis (4-Alil-2-metoksifenolis) yra svarbi benzeno žiedo / fenilpropiono rūgšties lakiųjų medžiagų klasė, plačiai paplitusi augalų žieduose ir subrendusiuose vaisiuose ir turintis įvairų biologinį poveikį bei sveikatos priežiūros funkcijas. Eugenolis gali pritraukti biologinį apdulkinimą ir platinti sėklas, apsaugoti žolėdžius gyvūnus, taip pat gali būti naudojamas kaip apsauginė priemonė, apsauganti nuo parazitinių organizmų, tokių kaip patogenai, invazijos; Eugenolis taip pat turi antioksidacinių, antibakterinių, anti-vabzdžių ir kvapiųjų savybių ir sulaukė didelio mokslininkų dėmesio. . Tuo pačiu metu eugenolis yra pagrindinis braškių vaisių aromato komponentas, tačiau jo kiekis oktoploidinių kultūrinių braškių vaisiuose yra žymiai mažesnis nei diploidinių laukinių braškių. Iki šiol eugenolio biosintezės kelias buvo iš esmės suprantamas augaluose ir dauguma nustatytų fenilpropanoido kelio reguliatorių (tokių kaip R2R3-MYB transkripcijos faktoriai FaMYB10 ir FaEOBII, DNR surišantis cinko piršto transkripcijos faktorius FaDOF2). buvo patvirtinti braškėse. Brandinimo etapas vaidina svarbų vaidmenį vėliau vystantis vaisiams, o eugenolio kiekis braškių vaisiuose yra didesnis stambių žalių vaisių stadijoje, tačiau neaišku, kaip eugenolio kaupimasis transkripciniu būdu reguliuojamas šiame etape.
Braškėse eugenolio gamybai būtini eugenolio sintazę koduojantys genai FaEGS1 ir FaEGS2 bei cinamilo alkoholio dehidrogenazę koduojantis genas FaCAD1. FaEGS1 ir FaEGS2 daugiausia buvo išreikšti braškių žaliuose vaisiuose ir prinokusiuose vaisiuose. Šiame tyrime, siekiant nustatyti transkripcijos veiksnius, susijusius su FaEGS1 reguliavimu, mielių vieno hibrido atranka buvo atlikta naudojant FaEGS1 promotorių kaip masalą, o atrankos metu toliau buvo tiriamas R2R3-MYB transkripcijos faktorius FaMYB63. rezultatus. FaMYB63 buvo lokalizuotas branduolyje, o RT-qPCR analizė parodė, kad FaMYB63 ekspresija buvo specifinė audiniams ir stadijai, atitinkanti eugenolio kiekį braškių vaisių vystymosi metu, ją slopino abscizo rūgštis (ABA) ir aktyvavo auksinas (IAA). Dėl FaMYB63 per didelio ekspresijos ir RNAi tarpininkaujamo nutildymo reikšmingai pasikeitė eugenolio sintezės genų FaEGS1, FaEGS2 ir FaCAD1 transkripto lygiai, o tai savo ruožtu paveikė eugenolio kaupimąsi. EMSA, mielių monohibrido, GUS aktyvumo ir dvigubo luciferazės aktyvumo tyrimai parodė, kad FaEOBII ir FaMYB10 transkripciją taip pat reguliavo FaMYB63, bet ne atvirkščiai. Kartu šie rezultatai suteikia naujų įžvalgų apie braškių eugenolio sintezės kelio reguliavimo tinklą.
